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完美的荧光成像,离不开这个关键点!

人阅读 发布时间:2023-04-14 16:56

荧光成像作为一项重要的研究手段,可以对细胞和组织中的物质进行定位与追踪,广泛应用于生命科学研究及疾病诊断治疗。

大家可能或多或少都接触过荧光成像实验,但是如何才能稳定而高效地获得一组出彩的免疫荧光数据呢?就像下图:

是不是有小伙伴忍不住惊呼:颜色绚烂、层次分明、荧光亮度强而且发光清晰?
这是怎么做到的?我也想get同款啊~~

别急别急,要想获得优秀的荧光图像,离不开以下几点:
1)科学的实验方案。IF实验方案小P之前做过总结,可参考这篇文章:免疫荧光(IF)这么做,实验数据更出彩!
2)熟练的实验操作。操作这块只能靠各位多多练习了,当然我们也整理一些案例和疑难解析,帮助大家快速避坑,可参考这篇文章:IHC/IF技术案例解答及资料下载
3)精密的荧光显微镜。仪器这里就靠各位的老板咯,小P无能为力。只能建议大家,能用confocal,就不要普通荧光显微镜!差距真的很大~
4)高品质的荧光染料,这里就有小P的发挥空间了,今天给大家着重介绍一下Proteintech新研发的CoraLite® Plus系列高品质荧光染料。

01 CoraLite® Plus染料 和 dPEG®技术

荧光染料,又称为荧光团或活性染料,主要用于标记各种生物分子。
传统的荧光染料,使用脂肪族或疏水性接头偶联生物分子,通常会由于接头臂之间的非特异性相互作用而导致最终产物出现问题。
后续人们出了一种优化方案,通过聚乙二醇化将聚乙二醇(PEG)链共价连接到荧光团等各种分子上,以增加其流体动力学体积、水溶性和稳定性。
CoraLite® Plus荧光染料作为Proteintech新研发的一种先进荧光染料,所用的则是以上方案的升级版,它采用了一种超亲水dPEG®技术
相较于传统PEG的聚乙二醇化,超亲水dPEG®技术一方面保留了PEG的优点,通过减少负电荷和增加亲水性来提升传统染料的偶联效率和荧光亮度;另一方面也因为均一的PEG分子大小而避免多分散性PEG分子所带来的空间位阻和互作位点屏蔽问题
以传统染料FITC、Pacific Blue™和Texas Red®为例,dPEG®技术同样也能显著提其高标记度和荧光亮度。

02 CoraLite® Plus染料效果展示

CoraLite® Plus荧光染料如此强大,用它来标记抗体之后,将获得以下buff加成:

CoraLite® Plus染料在理论上具有如此卓越的性能,那实际表现如何呢?我们同样很期待。
为此我们进行了一系列免疫学实验测试,包括免疫荧光(IF)、流式细胞术(FC)以及免疫印迹(WB)实验,下面是实验结果展示:

很明显,CoraLite® Plus系列染料,CoraLite® Plus标记抗体,在以上三种常见的免疫学实验中,都能出色完成任务!

03 CoraLite® Plus光谱特征

目前Proteintech上线的CoraLite® Plus系列染料共有五种,其光谱特征与Alexa Fluor®染料相似,具体数据如下:
CoraLite® Plus 荧光染料列表

CoraLite® Plus 光谱

作为Proteintech新上线的特色产品,我们已经将其偶联至一千余种常用一抗上,你可以直接采购适合的CoraLite® Plus直标一抗。
对于没有直标一抗的靶标,Proteintech新开发的全球首创FlexAble抗体标记试剂盒,能够让你在10分钟之内,针对任何品牌的抗体,进行低至0.5ug抗体的微量标记!

FlexAble抗体标记试剂盒介绍可参考这篇文章:全球首创 | 革新抗体标记技术,轻松实现微量标记!
04免费小工具-光谱查看器
当然,目前上线的几种CoraLite® Plus荧光染料,可能对于一些客户来说还不够用,因此Proteintech还提供APC、Atlantic Blue™、Cardinal Red™、 FITC、 FITC Plus、PE等选择,给你们提供更全面的选择方案!
最后一款彩蛋送给大家,在Proteintech官网上,隐藏着一个超级实用的、免费的、在线小工具——光谱查看器在线光谱查看器链接:
https://www.ptgcn.com/products/coralite-fluorescent-dye-conjugated-antibodies/#spectra
我们可以通过这款光谱查看器查看不同荧光染料的激发/发射波长,来设计多色组合实验,既方便又高效,赶紧收藏使用吧~

▲ Proteintech 光谱查看器

有了这款CoraLite® Plus染料,大家是不是对获得完美的荧光图像更有信心了?
助力科学研究,Proteintech从未止步!
相信我们的CoraLite® Plus荧光染料加上FlexAble抗体标记试剂盒强强组合,定能让你的免疫荧光实验和流式实验更加完美成功!

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