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353 人阅读发布时间:2025-09-10 13:50
第一次组会狂踩导师「雷区」:新接课题,研究人源肺癌细胞系 EGFR 蛋白,无明确靶点与实验思路;实验设计抄的别的 protocol,被追问「怎样筛选适配肺癌细胞系且 WB 杂带率低的替代 EGFR 抗体」,无法回应;就算选好抗体,后续 WB 孵育时间、IF 荧光标记步骤也无头绪,这次组会可谓是一问三不知,导师可能都要后悔招我了。

问题一:「Able,我做 WB 和 IF 实验,怎样筛选适配人源样本的 EGFR 抗体?」
Able 的答案


1、推荐产品清单
单克隆抗体:EGFR Monoclonal antibody (2A2H10),推荐稀释度:WB 1:5000-1:50000,
IF 1:2000-1:8000。
多克隆抗体:EGFR-Specific Polyclonal antibody,推荐稀释度:WB 1:1000-1:6000,IF 1:200-1:800。
重组抗体:EGFR Recombinant monoclonal antibody (240603F10),推荐稀释度:WB 1:2000-1:10000,IF 1:200-1:800。
2、关键分析与建议
高引用优先选择:66455-1-Ig(单克隆)和 18986-1-AP(多克隆)分别拥有 94 次和 171 次文献引用,其在人源样本 WB/IF 实验中的广泛适用性与可靠性。若需高特异性(如避免交叉反应),推荐单克隆抗体(如 66455-1-Ig);若需覆盖更多 EGFR 表位,可考虑多克隆抗体(如 18986-1-AP)。
磷酸化抗体需明确实验目的:如需检测 EGFR 磷酸化状态(如 Tyr1069/Tyr1092),请参考磷酸化抗体(如 30277-1-AP、30278-1-AP),但当前问题未指定磷酸化需求,故未列入主推列表。
问题二:「Able,我后续计划先通过 IHC-P 实验验证 EGFR 蛋白表达,再用 WB 检测其磷酸化水平,最后用 IF 观察蛋白定位,想知道同一品牌的 EGFR 抗体在这三种实验中染色效果、条带质量的潜在差异?」
Able 的答案


1、关键结论:抗体 - 实验适配性匹配
依据实验类型定向推荐抗体,同步提供核心验证依据与风险规避要点;
优势:确保抗体功能与实验目标高度契合,从源头降低适配失误导致的实验偏差。
2、具体产品验证数据对比
分类呈现适配 IHC-P、WB、IF 实验的抗体详情,含肺癌样本适用性、核心优势及实验稀释范围;
优势:为不同实验场景提供精准的抗体选择依据,明确操作参数,提升实验重复性与数据可靠性。
3、重要技术提醒
预判实验常见错误类型,提前输出风险规避方案;
优势:减少操作失误对实验结果的干扰,缩短试错周期,保障实验流程顺畅推进。
4、行动建议
基于抗体特性与实验需求制定分步操作指引,关联对应实验优化方向;
优势:明确执行路径,助力快速落地实验方案,高效获取符合科研标准的结果。
问题三:「Able,基于上一步思考,若发现该 EGFR 抗体在 WB 检测磷酸化水平时可能出现杂带,能否帮我筛选可兼容该肺癌细胞系且 WB 杂带率低的替代 EGFR 抗体?」
Able 的答案


1、关键结论与客观数据:抗体 - 实验适配性
梳理检索抗体的 WB 验证结果,明确标注通过验证抗体的货号、靶向磷酸化位点、WB 验证样本及验证图片链接,同步说明无杂带率数据的抗体信息;
优势:为抗体选择提供客观数据支撑,清晰呈现验证细节,便于科研人员追溯原始数据、评估抗体适配性。
2、行动建议
优先选用标注完整验证信息(含 WB 验证图片)的抗体,对无杂带率数据的抗体,建议通过预实验补充杂带检测;
优势:降低抗体选择风险,通过预实验完善数据,保障后续实验结果的可靠性。
问题四:「Able,选定替代 EGFR 抗体后,在人源肺癌细胞系 IHC-P 实验中,若按推荐参数操作仍出现染色背景过高,能否帮我排查除抗体外的其他影响因素?」
Able 的答案


1、高背景染色的核心原因及排查要点
按「内源性干扰 → 组织处理 → 阻断与冲洗」维度拆解高背景原因,针对性明确排查要点;
优势:建立系统化排查路径,快速定位高背景根源,避免盲目试错浪费实验资源。
2、背景值评估标准
制定量化评估标准,同步明确判断依据以及提供处理建议;
优势:提供统一、可落地的评估依据,减少背景值判断偏差,保障实验结果的一致性与可比性。
3、专家建议
在排查完内源性问题之后,验证抗体兼容性,设置对照组并逐步优化;
优势:从源头抑制干扰因素,降低背景染色基础风险,提升信号特异性。
问题五:「Able,若用优化后的方案完成所有实验,能否帮忙整合该 EGFR 抗体在人源肺癌细胞系 IHC-P、WB、IF 实验中的关键参数(如抗体稀释比、孵育时间),生成标准化实验操作模板?」
Able 的答案


1、核心结论:
整合实验数据,明确标注推荐抗体货号、适配的稀释比例、孵育条件及已验证样本类型;
优势:提供清晰的实验核心参数,减少抗体与实验条件匹配的试错成本,为实验开展提供直接依据。
2、标准化实验操作模板:
针对 WB、IHC-P、IF 三种实验,分别制定含操作参与阴阳对照设置的标准化模板;
优势:统一实验操作流程,避免因参数差异或对照缺失导致的结果偏差,提升实验重复性与数据可信度。
3、关键注意事项:
明确样本处理需保持一致性,严格遵循对照设置要求,同步落实背景控制措施;
优势:从样本到结果全程把控实验变量,减少无关因素干扰,保障实验结果的准确性与可比性。
4、专家建议
提出优先选择试剂盒或相应抗体;
优势:提供清晰的实验建议,减少不必要的重复。
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Proteintech 与 Able 的故事
Proteintech 集团成立于 2001 年,是抗体、蛋白质、ELISA 试剂盒以及纳米抗体的知名制造商。Proteintech 拥有覆盖人类蛋白质组三分之二靶标的自主研发抗体库,旗下产品广泛应用于基础科研和医药研发领域,生产基地通过 ISO13485 和 ISO9001 国际认证,可生产 GMP 级别的细胞因子、生长因子等人源细胞表达的生物活性蛋白。产品目前累计被 SCI 文章引用 35 万次。
在与科学家们的合作过程中我们发现,从海量候选抗体库中筛选出最合适的抗体,是一个巨大的挑战。基于当前快速发展的人工智能技术,我们通过大量的产品数据、实验数据以及相关科学知识训练,开发出了一款人工智能实验助手——Able。
当你新接手一个研究方向,却没有研究目标和思路时;当你检索一个靶标抗体,发现检索结果多达数十条时;当你费尽心思选定抗体,却不知如何着手实验时,你只需要打开 Able 对话框,问上一句:
你好 Able,我准备做细胞自噬,请问该如何检测自噬的变化呢?
你好 Able,能帮我推荐用于小鼠样本 WB 实验的 LC3 和 P62 抗体吗
你好 Able,这个 LC3 抗体做 WB 实验的最佳推荐稀释比是多少呀?
......
一切都刚刚好。Able 就像实验室里那个性格内敛却乐于助人的大师兄大师姐一样,平时安静地看文献做实验,但你有问题去请教时,他们倾囊相授。
Able 的使命
Able 人工智能实验助手是 Proteintech 继上半年 3D 抗原表位图谱数据库之后又一项创新型、共享型成果。3D 抗原表位图谱为全球科研院所和医药研发单位共享了 Proteintech 的精确抗原表位信息数据库。而 Able 人工智能实验助手,则是与全球科研人员共享了 Proteintech 的产品数据、实验数据以及与之相关学科背景知识;让大家能够在短短几秒钟内,获得企业研发专家级别的协助。
「Able 标志着我们赋能科研人员使命的全新阶段。在 3D 抗原表位图谱成功的基础上,Able 提供定制化的产品推荐和实验设计支持,让科研人员能更专注于前沿探索。我们致力于突破试剂技术边界,给每位科学家带来更优质的科研服务与科学成果。」
——Proteintech 首席执行官 李建勋博士
为庆祝 Able 顺利诞生,给率先尝试 Able 的体验官们一点惊喜,学霸特别争取到了 50 名 Proteintech「现货一抗半价」专属福利!具体参与方式,请联系售前客服(扫码页面右下角)获取。名额有限,赶快参与吧~
